Διάγνωση της χρόνιας κοκκιωματώδους νόσου

Διαγνωστικά

Η διάγνωση της χρόνιας κοκκιωματώδους νόσου βασίζεται στην αξιολόγηση της λειτουργικής δραστηριότητας των φαγοκυττάρων. Χρησιμοποιούνται οι ακόλουθες εξετάσεις:

1. Δοκιμή αναγωγής νιτρομπλε τετραζολίου (δοκιμή NBT). Κανονικά, όταν τα φαγοκύτταρα απορροφούν την κίτρινη χρωστική ουσία νιτρομπλε τετραζόλιο (NBT), η μεταβολική τους δραστηριότητα αυξάνεται, ενώ το NBT οξειδώνεται και τα προϊόντα αυτής της αντίδρασης χρωματίζονται μπλε. Εάν ο μεταβολισμός των φαγοκυττάρων διαταραχθεί, η ένταση του μπλε χρωματισμού μειώνεται.
2. Χημειοφωταύγεια ουδετερόφιλων. Η οξείδωση του υποστρώματος συνοδεύεται από εκπομπή υπεριώδους φωτός ή φθορισμό, η ένταση της εκπομπής μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να κριθεί η λειτουργική δραστηριότητα των φαγοκυττάρων.
3. Αξιολόγηση της φαγοκυτταρικής δράσης: η ικανότητα των φαγοκυττάρων να καταστρέφουν τα θετικά στην καταλάση βακτήρια in vitro.
4. Γενετική εξέταση ασθενών και των οικογενειών τους κατά την ανίχνευση διαταραχών της λειτουργικής δραστηριότητας των φαγοκυττάρων.

Ορισμός τύπων και υποτύπων χρόνιας κοκκιωματώδους νόσου

Η ανοσοαποτύπωση με αντισώματα και στα τέσσερα συστατικά της NADPH οξειδάσης χρησιμοποιείται συνήθως για τη διαφοροποίηση των τύπων και υποτύπων χρόνιας κοκκιωματώδους νόσου. Εάν ένα από τα κυτοσολικά συστατικά (p47 ^phax ή p67 ^phax ) απουσιάζει από το αποτύπωμα, αυτό υποδηλώνει μια μετάλλαξη στο αντίστοιχο γονίδιο, ενώ εάν ένα από τα συστατικά της μεμβράνης (gр91 ^phax ή p22 ^phax ) απουσιάζει, το άλλο επίσης δεν ανιχνεύεται, καθώς οι υπομονάδες σταθεροποιούνται μεταξύ τους για πλήρη ωρίμανση και έκφραση. Μερικοί ερευνητές χρησιμοποιούν κυτταροροομετρία με αντισώματα κατά του κυτοχρώματος p558 για την ανίχνευση gp91 ^phax /p22 ^phax στην επιφάνεια των ουδετερόφιλων. Τελικά, η διάγνωση επιβεβαιώνεται με την αναγνώριση μιας μετάλλαξης στο αντίστοιχο γονίδιο.

Προγεννητική διάγνωση χρόνιας κοκκιωματώδους νόσου

Πριν γίνουν διαθέσιμες οι μοριακές γενετικές τεχνολογίες, η προγεννητική διάγνωση της χρόνιας κοκκιωματώδους νόσου πραγματοποιούνταν μετρώντας τη δραστικότητα της NADPH οξειδάσης των εμβρυϊκών ουδετερόφιλων και συλλέγοντας αίμα ομφάλιου λώρου με εμβρυοσκόπηση στις 16-18 εβδομάδες κύησης. Η ανάλυση DNA κυττάρων αμνιακού υγρού ή χοριακών λαχνών πραγματοποιείται πλέον για την αναζήτηση συγκεκριμένων γονιδιακών ελαττωμάτων χρησιμοποιώντας Southern blotting, αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης και πολυμορφισμό μήκους θραυσμάτων περιορισμού, ο οποίος είναι πιο αξιόπιστος και επιτρέπει τη διάγνωση νωρίτερα στην εγκυμοσύνη.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ]