Μικροσκοπία Confocal

Η ομοεστιακή μικροσκοπία θεωρείται σήμερα μία από τις πιο πολλά υποσχόμενες μεθόδους για την in vivo απεικόνιση του δέρματος, γι' αυτό και το ενδιαφέρον γι' αυτήν είναι ασυνήθιστα υψηλό τόσο μεταξύ των κλινικών ιατρών όσο και των εκπροσώπων ερευνητικών ιδρυμάτων.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]

Δυνατότητες Συνεστιακής Μικροσκοπίας

Στη δερματολογία, η ομοεστιακή μικροσκοπία με λέιζερ χρησιμοποιείται για:

• μελέτη της διείσδυσης ενώσεων στο δέρμα (διαδρομές διείσδυσης, κινητική, κατανομή στο δέρμα)·
• παρατήρηση της λειτουργίας των αδένων (προσδιορισμός της ενεργητικής και παθητικής κατάστασης)·
• μελέτες της μικροκυκλοφορικής κλίνης (συμπεριλαμβανομένου του πραγματικού χρόνου)·
• διάγνωση νεοπλασμάτων.

Χωρίς να αναλύσουμε τα πλεονεκτήματα και τα μειονεκτήματα των προαναφερθέντων τύπων ομοεστιακής μικροσκοπίας, σημειώνουμε ότι τα τελευταία χρόνια, η ομοεστιακή μικροσκοπία με λέιζερ φθορισμού έχει γίνει ολοένα και πιο δημοφιλής.

[ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]

Συνεστιακή μικροσκοπία για εξέταση δέρματος

Το ομοεστιακό μικροσκόπιο παρέχει δύο ανεκτίμητες ευκαιρίες - τη μελέτη ιστών σε κυτταρικό επίπεδο σε κατάσταση φυσιολογικής ζωτικής δραστηριότητας και την επίδειξη των αποτελεσμάτων της μελέτης (δηλαδή της κυτταρικής δραστηριότητας) σε τέσσερις διαστάσεις - ύψος, πλάτος, βάθος και χρόνο. Για την ποιότητα της εικόνας και το βάθος της μελέτης, τον σημαντικότερο ρόλο παίζει η ικανότητα του ιστού να μεταδίδει φως, με άλλα λόγια, η διαφάνειά του. Η μέθοδος ομοεστιακής μικροσκοπίας είναι ανέπαφη, η δέσμη φωτός δεν προκαλεί καμία βλάβη ή δυσφορία στον εξεταζόμενο ασθενή ή στο πειραματόζωο.

Η μικροσκοπία συνεστιακής σάρωσης με λέιζερ (CSLM) χρησιμοποιείται για την εξέταση του δέρματος. Η μέθοδος επιτρέπει την απεικόνιση της επιδερμίδας και του θηλώδους στρώματος του χορίου με ανάλυση κοντά στην ιστολογική. Όλα τα αποτελέσματα της εξέτασης εμφανίζονται στην οθόνη και αποθηκεύονται ως πακέτο αρχείων εικόνας (ως μικροφίλμ (σε δυναμική) ή μικροφωτογραφίες).

Υπάρχουν δύο τύποι της μεθόδου:

• ανακλαστική (ανακλαστικότητα CSLM) - με βάση το γεγονός ότι διάφορες ενδοκυτταρικές και μεσοκυτταρικές δομές έχουν διαφορετικούς δείκτες διάθλασης φωτός, γεγονός που επιτρέπει την απόκτηση μιας εικόνας αντίθεσης.
• φθορισμός (φθορισμός CSLM) - χρησιμοποιεί φως λέιζερ που διεισδύει στο δέρμα και διεγείρει εξω- ή ενδοχρωμοφόρα σε αυτό, τα οποία σε απόκριση αρχίζουν να εκπέμπουν φωτόνια (δηλαδή φθορίζουν).

Η πλευρική ανάλυση είναι η ελάχιστη απόσταση μεταξύ σημείων που βρίσκονται σε οριζόντιο επίπεδο, δηλαδή σε επίπεδο παράλληλο με την επιφάνεια του δέρματος. Η αξονική ανάλυση είναι η ελάχιστη απόσταση μεταξύ σημείων που βρίσκονται σε επίπεδο κάθετο στην επιφάνεια του δέρματος.

[ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Ιστορία της ομοεστιακής μικροσκοπίας

Η ιδέα της δημιουργίας ενός μικροσκοπίου ικανού να απεικονίσει μια τομή ζωντανού ιστού σε κυτταρικό επίπεδο αναπτύχθηκε ενεργά πριν από 130 χρόνια. Το κύριο στοιχείο των σύγχρονων μικροσκοπίων σχεδιάστηκε στα τέλη του 19ου αιώνα και ήταν ένας περιστρεφόμενος δίσκος με μικροσκοπικές οπές διατεταγμένες σε σπείρα. Αυτός ο δίσκος εφευρέθηκε το 1883 από τον Γερμανό φοιτητή Paul Nipkow, από τον οποίο πήρε το όνομά του - δίσκος Nipkow (ή δίσκος Nipkow). Η εφεύρεση βασίστηκε στην ικανότητα του φωτός, που διέρχεται από μικροσκοπικές οπές στον δίσκο και έναν μεγεθυντικό φακό, να διεισδύει βαθιά στον ιστό και να φωτίζει ένα θραύσμα κυττάρου σε απόσταση από την επιφάνεια. Όταν ο δίσκος περιστρέφεται γρήγορα, τα θραύσματα σχηματίζουν μια ενιαία εικόνα. Μετακινώντας τη δομή μακριά ή πιο κοντά στο αντικείμενο, είναι δυνατό να μεταβληθεί το βάθος της οπτικής τομής του ιστού που μελετάται.

Μόνο με την έλευση των βιντεοκαταγραφικών τη δεκαετία του 1980 και των υπολογιστών ικανών να επεξεργάζονται εικόνες στις αρχές της δεκαετίας του 1990 κατέστη δυνατή η δημιουργία και η αποτελεσματική χρήση των σύγχρονων μικροσκοπίων που χρησιμοποιούνται σήμερα.