Αιματοποιητικά βλαστοκύτταρα του σάκου κρόκου

Προφανώς, διάφορες πολλαπλασιαστικών και διαφοροποίηση των αιμοποιητικών βλαστικών κυττάρων δραστικότητα λόγω των ιδιαιτεροτήτων της οντογενετικής ανάπτυξή τους, επειδή κατά τη διαδικασία της οντογένεσης στο ανθρώπινο αλλαγή ακόμη και τον εντοπισμό των κύριων περιοχών της αιμοποίησης. Τα αιμοποιητικά προγονικά κύτταρα είναι εμβρυϊκά λεκιθικό σάκο του δεσμευτεί αποκλειστικά σε σχηματισμό ερυθροποιητική κυτταρικών γραμμών. Μετά τη μετανάστευση της πρωτοταγούς GSK στο ήπαρ και τη σπλήνα στο μικροπεριβάλλον αυτών των οργάνων, το φάσμα των γραμμών επικοινωνίας επεκτείνεται. Συγκεκριμένα, αιματοποιητικά βλαστοκύτταρα αποκτούν την ικανότητα να παράγουν λεμφοειδείς σειρές. Στην προγεννητική περίοδο, αιματοποιητικά πρόδρομα κύτταρα φθάνουν στη ζώνη τελικού εντοπισμού και αποικίζουν τον μυελό των οστών. Στη διαδικασία της εμβρυϊκής ανάπτυξης στο αίμα του εμβρύου, υπάρχει σημαντικός αριθμός αιματοποιητικών κυττάρων του στελέχους. Για παράδειγμα, στη 13η εβδομάδα της εγκυμοσύνης, το επίπεδο HSC φθάνει το 18% του συνολικού αριθμού μονοπύρηνων κυττάρων αίματος. Στο μέλλον, υπάρχει μια προοδευτική μείωση της περιεκτικότητας τους, αλλά ακριβώς πριν από τον αριθμό γέννηση του HSC στο αίμα του ομφάλιου λώρου δεν είναι πολύ διαφορετικό από τον αριθμό τους στο μυελό των οστών.

Σύμφωνα με την κλασική ιδέες, μια φυσική μεταβολή στον εντοπισμό της αιμοποίησης κατά τη διάρκεια της εμβρυϊκής ανάπτυξης των θηλαστικών διεξάγεται από την μετανάστευση και την εφαρμογή μιας νέας μικροπεριβάλλοντος πολυδύναμα αιματοποιητικά βλαστικά κύτταρα - από το λεκιθικό σάκο στο ήπαρ, σπλήνα και μυελό των οστών. Από τα πρώτα στάδια της εμβρυϊκής ανάπτυξης των αιμοποιητικών ιστών περιέχει ένα μεγάλο αριθμό των βλαστικών κυττάρων, η οποία μειώνεται καθώς κύησης, η πιο πολλά υποσχόμενη για την απόκτηση αιμοποιητικά βλαστοκύτταρα θεωρείται αιμοποιητικών εμβρυϊκό ήπαρ ιστών που έχουν απομονωθεί από abortnogo υλικού σε 5-8 εβδομάδων κύησης.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9]

Η προέλευση των αιματοποιητικών βλαστικών κυττάρων

Το γεγονός ότι το εμβρυϊκό παραγωγή ερυθρών αιμοσφαιρίων προέρχεται από τα νησιά του αίματος του λεκιθικού σάκου, χωρίς αμφιβολία. Ωστόσο, in vitro δυναμικό διαφοροποίησης των αιμοποιητικών κυττάρων σάκου χ κρόκου είναι πολύ περιορισμένη (διαφοροποιούνται κυρίως ερυθροκύτταρα). Θα πρέπει να σημειωθεί ότι η μεταμόσχευση αιμοποιητικών βλαστικών κυττάρων του σάκου του κρόκου δεν είναι σε θέση να αποκαταστήσει την αιμοποίηση για μεγάλο χρονικό διάστημα. Αποδείχθηκε ότι αυτά τα κύτταρα δεν είναι οι πρόδρομοι της GSK ενός ενήλικου οργανισμού. True GSK εμφανίζονται νωρίτερα, στις 3-5 εβδομάδες της εμβρυϊκής ανάπτυξης, στη ζώνη σχηματισμού του γαστρικού ιστού και ενδοθήλιο των αιμοφόρων αγγείων (paraaortic splanchnopleura, Ρ-SP), και στη θέση των σελιδοδεικτών αορτής γονάδων και πρωτογενή νεφρικά - στον τομέα ή έτσι mesonephros που ονομάζεται περιοχή AGM. Έχει δειχθεί ότι τα κύτταρα AGM-περιοχή δεν είναι μόνο μια πηγή HSC, αλλά ενδοθηλιακά κύτταρα των αιμοφόρων αγγείων, και οστεοκλάστες, οι διαδικασίες που εμπλέκονται στο σχηματισμό των οστών. Από την 6η εβδομάδα της κύησης νωρίς αιμοποιητικών προγονικών κυττάρων από AGM-συνοικία ταξίδια στο ήπαρ, που είναι τα κύρια αιμοποιητικά όργανα του εμβρύου πριν από τη γέννηση.

Από το σημείο αυτό είναι εξαιρετικά σημαντικό από την άποψη της μεταμόσχευσης κυττάρων, το πρόβλημα της προέλευσης των HSCs κατά την εμβρυϊκή ανθρώπινη αξίζει μια πιο λεπτομερή παρουσίαση. Η κλασική ιδέα ότι τα αιμοποιητικά βλαστικά κύτταρα των θηλαστικών και των πτηνών που προέρχονται από εξαρτηματικές πηγή, με βάση την έρευνα Metcalf and Moore, ο οποίος χρησιμοποιήθηκε για πρώτη φορά τεχνικές κλωνοποίησης GSK και των απογόνων τους, που απομονώνονται από το λεκιθικό σάκο. Τα αποτελέσματα της εργασίας τους αποτέλεσαν τη βάση για τη θεωρία της μετανάστευσης, σύμφωνα με την οποία η GSK, εμφανίστηκε για πρώτη φορά στο λεκιθικό σάκο, καταλαμβάνουν σταθερά παροδικές και οριστική αιμοποιητικών οργάνων στη διαδικασία του σχηματισμού στις αντίστοιχες μικροπεριβάλλον τους. Και γι 'αυτό έχει δημιουργήσει μια άποψη ότι η γενιά των GSK αρχικά εντοπίζεται στο σάκο κρόκου, είναι η κυτταρική βάση για την οριστική αιμοποίηση.

Τα αιμοποιητικά προγονικά κύτταρα του σάκου του κρόκου είναι από τα πιο νωρίς αιμοποιητικών προγονικών κυττάρων. φαινότυπο τους περιγράφεται από ΑΑ4.1 + CD34 + c-kit +. Σε αντίθεση με HSCs ώριμη μυελού των οστών, δεν εκφράζουν τα αντιγόνα Sca-1 και MHC μορίου. Φαίνεται ότι η εμφάνιση των αντιγόνων δεικτών επί των επιφανειακών μεμβρανών της GSK λεκιθικό σάκο με καλλιέργεια αντιστοιχεί σε διαφοροποίηση τους κατά τη διάρκεια της εμβρυϊκής ανάπτυξης με σχηματισμό δεσμευτεί γραμμές της αιμοποίησης: μειώνει το επίπεδο έκφρασης του αντιγόνου CD34 και Thy-1 αυξάνει την έκφραση του CD38 και CD45RA, εμφανίζονται τα μόρια HLA-DR. Στην επακόλουθη επαγόμενη από κυτοκίνες και αυξητικούς παράγοντες, ίη vitro έκφραση της εξειδίκευσης αρχίζει αντιγόνα ειδικά για αιμοποιητικά προγονικά κύτταρα της συγκεκριμένης κυτταρικής σειράς. Ωστόσο, τα αποτελέσματα της μελέτης των εμβρυϊκών αιμοποίηση σε εκπροσώπους των τριών τάξεων των σπονδυλωτών (αμφίβια, πτηνά και θηλαστικά), και ιδίως, η ανάλυση της προέλευσης των HSCs είναι υπεύθυνοι για την οριστική αιμοποίηση στη μεταγεννητική οντογένεση, σε αντίθεση με την κλασική ιδέες. Διαπιστώθηκε ότι οι εκπρόσωποι όλων των παραπάνω κατηγοριών στην εμβρυογένεση σχηματίζονται δύο ανεξάρτητες περιοχές που αντιμετωπίζουν GSK. Extraembryonic «κλασική» περιοχή που αντιπροσωπεύεται λεκιθικό σάκο ή ανάλογά της, ενώ η ταυτοποιήθηκε πρόσφατα intraembrionalnaya ζώνη εντοπισμού HSC περιλαμβάνει παρα-αορτικής μεσέγχυμα και AGM-περιοχή. Σήμερα, μπορεί να υποστηριχθεί ότι τα αμφίβια και τα πουλιά οριστική HSCs που προέρχονται από intraembrionalnyh πηγές, ενώ στα θηλαστικά και τον άνθρωπο GSK μέρος του σάκου του κρόκου στην οριστική αιμοποίηση εξακολουθεί να είναι αδύνατο να εξαλειφθεί εντελώς.

Εμβρυϊκά αιματοποίηση στον λεκιθικό σάκο είναι ουσιαστικά πρωτογενή ερυθροποίηση, η οποία χαρακτηρίζεται από τη διατήρηση του πυρήνα σε όλα τα στάδια της ωρίμανσης ερυθροκυττάρων και τον τύπο της σύνθεσης εμβρυϊκής αιμοσφαιρίνης. Σύμφωνα με τα τελευταία δεδομένα, το κύμα πρωτογενούς ερυθροποίησης τερματίζεται στον σάκο κρόκου την 8η ημέρα της εμβρυϊκής ανάπτυξης. Αυτό ακολουθείται από μια περίοδο συσσώρευσης των οριστικών ερυθροειδών προγονικών κυττάρων - BFU-E, τα οποία σχηματίζονται αποκλειστικά στο σάκο κρόκο και εμφανίστηκε για πρώτη φορά στις 9 η ημέρα της κύησης. Το επόμενο στάδιο εμβρυογένεσης σχηματίζει ήδη τα οριστικά ερυθροειδή προγονικά κύτταρα - CFU-E, καθώς και (!) Μαστοκύτταρα και CFU-GM. Βασίζεται στην ύπαρξη αυτής της απόψεως ότι οι οριστικοί προγονικά κύτταρα προκύπτουν στο σάκο κρόκο, μεταναστεύουν μέσω του αίματος, συσσωρεύονται στο συκώτι και γρήγορα ξεκινήσει η πρώτη φάση intraembrionalnogo αιμοποίηση. Σύμφωνα με αυτές τις παραστάσεις, το sac κρόκος μπορεί να θεωρηθεί, αφενός, ως ο τόπος της πρωτογενούς ερυθροποίησης, και από την άλλη - ως μια πρώτη πηγή του οριστικού αιμοποιητικών προγονικών κυττάρων στην εμβρυϊκή ανάπτυξη.

Έχει αποδειχθεί ότι τα κύτταρα σχηματισμού αποικιών με υψηλή πολλαπλασιαστικού δυναμικού μπορεί να απομονωθεί από το λεκιθικό σάκο είναι ήδη στην 8η ημέρα της κύησης, δηλαδή, πολύ πριν από το κλείσιμο του αγγειακού συστήματος του εμβρύου και λεκιθικό σάκο. Επιπλέον προέρχεται από το λεκιθικό σάκο με υψηλό δυναμικό πολλαπλασιασμού in vitro κύτταρα σχηματισμού αποικίας, το μέγεθος και η κυτταρική σύνθεση η οποία δεν διαφέρει από τις αντίστοιχες παραμέτρους της ανάπτυξης καλλιέργειας βλαστικών κυττάρων του μυελού των οστών. Ταυτόχρονα, με επανα-μεταμόσχευση αποικία κύτταρα λεκιθικού σάκου με υψηλό πολλαπλασιαστικό δυναμικό σχηματίζεται σημαντικά περισσότερα κύτταρα και θυγατρικών πολυδύναμων προγονικών κυττάρων που σχηματίζουν ό, τι με το μυελό των οστών αιμοποιητικών προγονικών κυττάρων αποικία.

Το τελικό συμπέρασμα σχετικά με το ρόλο των αιμοποιητικών βλαστικών κυττάρων στο λεκιθικού σάκου οριστικό αιματοποίηση μπορεί να δώσει αποτελέσματα κατά την οποία οι συγγραφείς που λαμβάνεται μια γραμμή ενδοθηλιακών κυττάρων του λεκιθικού σάκου (G166), η οποία υποστηρίζεται αποτελεσματικά τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων του με φαινοτυπικά και λειτουργικά χαρακτηριστικά των HSC (ΑΑ4.1 + WGA +, χαμηλής πυκνότητας και αδύναμες συγκολλητικές ιδιότητες). Το περιεχόμενο της τελευταίας όταν καλλιεργούνται σε ένα τροφοδοτικό στρώμα κυττάρων στο S166 για 8 ημέρες αυξήθηκαν περισσότερο από 100 φορές. Οι μικτές αποικίες αναπτύσσονται επί του υποστρώματος του της κυτταρικής γραμμής S166, ταυτοποιήθηκαν μακροφάγα, κοκκιοκύτταρα, μεγακαρυοκύτταρα, μονοκύτταρα και κύτταρα έκρηξη, και πρόδρομα κύτταρα των Β και Τ λεμφοκυττάρων. Κρόκο κύτταρα sac, που αναπτύσσονται σε ένα υπόστρωμα ενδοθηλιακών κυττάρων έχουν την ικανότητα να αναλάβει και κρατήθηκε αναπαράγει στα πειράματα των συγγραφέων σε τρεις διόδους. Ανάκτηση μέσω αυτών αιματοποίηση σε ενήλικες ποντικούς με σοβαρή συνδυασμένη ανοσοανεπάρκεια (SCID) συνοδεύεται από το σχηματισμό όλων των τύπων λευκοκυττάρων, καθώς Τ και Β λεμφοκύτταρα. Ωστόσο, οι συγγραφείς της έρευνας τους, χρησιμοποιώντας κύτταρα του κρόκου σάκο των 10 ημερών έμβρυο, από τα οποία το εξω- και intraembrionalnye αγγειακό σύστημα έχει ήδη κλείσει, αυτό δεν αποκλείει την παρουσία μεταξύ των κυττάρων του κρόκου σάκο GSK intraembrionalnogo προέλευσης.

Ταυτόχρονα, ανάλυση του δυναμικού διαφοροποιήσεως των αιμοποιητικών κυττάρων του πρώιμα στάδια της ανάπτυξης, πριν από το συνδυασμό της επιλεγμένης σύστημα αγγειακό του εμβρύου και το λεκιθικό σάκο (8-8,5 ημέρες κύησης) αποκάλυψε την παρουσία των προδρόμων των Τ και Β κυττάρων στο λεκιθικό σάκο, αλλά όχι στο σώμα του εμβρύου . Η μέθοδος in vitro του συστήματος καλλιέργειας δύο σταδίων σε μία μονοστοιβάδα επιθηλιακών και υποεπιθηλιακών κύτταρα των μονοπύρηνων κυττάρων του θύμου διαφοροποιήθηκαν στο λεκιθικό σάκο του προ-Τ και ώριμα Τ-λεμφοκύτταρα. Υπό τις ίδιες συνθήκες καλλιέργειας, αλλά σε μια μονοστοιβάδα των στρωματικά κύτταρα του ήπατος και του μυελού των οστών μονοπύρηνα κύτταρα του σάκου του κρόκου διαφοροποιήθηκαν σε προ-Β κύτταρα και ώριμα IglVT-Β-λεμφοκύτταρα.

Τα αποτελέσματα αυτών των μελετών υποδεικνύουν την πιθανότητα της ανάπτυξης των κυττάρων του ανοσοποιητικού συστήματος από extraembryonic ιστό λεκιθικό σάκο, το σχηματισμό των πρωτογενών Τ και Β κυτταρικές γραμμές εξαρτώνται από παράγοντες αιμοποιητικά στρωματικά μικροπεριβάλλοντος των εμβρυϊκών οργάνων.

Άλλοι συγγραφείς ανέφεραν επίσης ότι λεκιθικό σάκο κύτταρα με ισχείς περιλαμβάνει μία λεμφοειδή διαφοροποίηση, και σχηματίζεται λεμφοκύτταρα δεν διαφέρουν από εκείνες αντιγονικά χαρακτηριστικά σε ώριμα ζώα. Έχει βρεθεί ότι τα κύτταρα του λεκιθικού σάκου των 8-9 ημερών έμβρυο μπορεί να αποκαταστήσει το θυμικό λεμφοποίησης σε atimotsitarnom με την εμφάνιση της ώριμης CD3 + CD4 + - και CD8 + SDZ + λεμφοκύτταρα κατέχοντας διακοσμημένα ρεπερτόριο των υποδοχέων Τ κυττάρων. Έτσι, ο θύμος αδένας μπορεί να κατοικούνται από κύτταρα εξαρτημάτων του δέρματος προέλευση, αλλά είναι αδύνατον να αποκλείσουμε την πιθανότητα της μετανάστευσης στα θύμου προγονικών κυττάρων από τα Τ λεμφοκύτταρα από intraembrionalnyh πηγές λεμφοποίηση.

Ωστόσο, η μεταμόσχευση των αιμοποιητικών κυττάρων λεκιθικού σάκου σε ακτινοβολημένα ενήλικα λήπτες δεν είναι πάντα ολοκληρωθεί εμπλουτισμού πληθυσμών μακρά κατέστρεψε ζώνες αιμοποιητικών εντοπισμό ιστού, ένα in vitro κύτταρα του σάκου του κρόκου σχηματίζουν σπληνική αποικίες πολύ μικρότερες από ό, τι τα κύτταρα AGM-περιοχή. Σε ορισμένες περιπτώσεις, μέσω του λεκιθικού σάκου κύτταρα 9-ημερών έμβρυο είναι ακόμη δυνατόν να επιτευχθεί μακροπρόθεσμη (μέχρι 6 μήνες) επαναπληθυσμό των αιμοποιητικών ιστών ακτινοβολημένους δέκτες. Οι συγγραφείς πιστεύουν ότι τα κύτταρα του λεκιθικού σάκου φαινότυπο CD34 + c-kit + από την ικανότητά τους να ανασυστήσουν το κατεστραμμένη αιμοποιητικά όργανα, όχι μόνο δεν διαφέρουν από εκείνες του AGM-περιοχή, αλλά επίσης να επαναφέρετε πιο αποτελεσματικά αιμοποίηση, όπως στην λεκιθικό σάκο που περιείχαν σχεδόν 37 φορές περισσότερο .

Θα πρέπει να σημειωθεί ότι σε πειράματα, τα αιμοποιητικά κύτταρα του σάκου του κρόκου με αντιγόνα δεικτών GSK (c-kit + και / ή CD34 + και CD38 +), τα οποία εισήχθησαν απευθείας στο ήπαρ ή την κοιλιακή φλέβα απογόνους των θηλυκών ποντικιών που έλαβαν ενέσεις βουσουλφάνης έως 18η ημέρα της κύησης. Σε αυτά τα νεογέννητα ζώα δικό μυελοποίηση ήταν απότομα κατάθλιψη λόγω της εξάλειψης των αιμοποιητικών βλαστικών κυττάρων που προκαλείται από βουσουλφάνη. Μετά τη μεταμόσχευση, HSCs του σάκου του κρόκου για μήνες και στο περιφερικό αίμα των παραληπτών που προσδιορίζονται σωμάτια που περιέχουν τον προσωπικό δότη - glitserofasfatdegidrogenazu. Έχει βρεθεί ότι ο κρόκος σάκος της GSK μειωμένη περιεκτικότητα των λεμφοειδών κυττάρων, μυελοειδών και ερυθροειδείς κυτταρικές γραμμές του αίματος, θύμου, σπλήνα και μυελό των οστών, όπου το επίπεδο του χιμαιρισμού ήταν υψηλότερη στην περίπτωση της ενδοηπατικής, δεν ενδοφλέβια κύτταρα λεκιθικού σάκου. Οι συγγραφείς προτείνουν ότι HSCs του κρόκου σάκο των εμβρύων πρώτα στάδια της ανάπτυξης (μέχρι 10 ημέρες) για την επιτυχή διακανονισμό των αιμοποιητικών οργάνων των ενηλίκων δικαιούχων που έχουν ανάγκη από μια προκαταρκτική συνεργασία με αιμοποιητικού μικροπεριβάλλοντος του ήπατος. Είναι πιθανό ότι στην εμβρυογένεση υπάρχει ένα μοναδικό στάδιο της ανάπτυξης, όταν τα κύτταρα του σάκου του κρόκου, μεταναστεύουν κυρίως στο ήπαρ, και στη συνέχεια αποκτούν την ικανότητα να αποικίζουν το στρώμα αιμοποιητικά όργανα των ενηλίκων παραληπτών.

Από την άποψη αυτή θα πρέπει να σημειωθεί ότι η χιμαιρισμός των κυττάρων του ανοσοποιητικού συστήματος παρατηρείται συχνά μετά από μεταμόσχευση κυττάρων μυελού των οστών σε ακτινοβολημένους δέκτες σεξουαλικώς ώριμα - στα κύτταρα του αίματος του δότη τελευταία φαινοτύπων σε αρκετά μεγάλες ποσότητες βρίσκονται μεταξύ των Β- και Τ-λεμφοκύτταρα και κοκκιοκύτταρα παραλήπτη που διαρκεί τουλάχιστον 6 μήνες.

Μορφολογικές μέθοδοι αιμοποιητικών κυττάρων σε θηλαστικά εντοπίστηκε για πρώτη φορά την 7η ημέρα της εμβρυϊκής ανάπτυξης και παρουσιάζει αιμοποιητικών νησιά εντός των αιμοφόρων του λεκιθικού σάκου. Ωστόσο, η φυσική αιμοποιητική διαφοροποίηση στο λεκιθικό σάκο περιορίζεται πρωτογενούς ερυθροκύτταρα διατήρηση πυρήνα και συνθέτοντας εμβρυϊκής αιμοσφαιρίνης. Ωστόσο, παραδοσιακά θεωρήθηκε ότι ο σάκος του κρόκου είναι η μόνη πηγή HSC μεταναστεύουν προς τα αιμοποιητικά όργανα του αναπτυσσόμενου εμβρύου και να παρέχει οριστική αιμοποίηση σε ενήλικα ζώα, αφού η εμφάνιση της HSC στο σώμα του εμβρύου είναι το κλείσιμο του αγγειακού συστήματος του εμβρύου και τον κρόκο σάκο. Προς υποστήριξη αυτής της άποψης, σύμφωνα με τα στοιχεία ότι σε in vitro κλωνοποίηση των κυττάρων των λεκιθικού σάκου προκαλούν κοκκιοκύτταρα και μακροφάγα, μια in vivo - αποικίες σπληνός. Στη συνέχεια, κατά τη διάρκεια πειραμάτων μεταμόσχευσης βρέθηκε ότι τα αιμοποιητικά κύτταρα του λεκιθικού σάκου, τα οποία, στο λεκιθικό σάκο είναι σε θέση να διαφοροποιήσει μόνο μέσα στα πρωτογενή ερυθρά αιμοσφαίρια στο μικροπεριβάλλον του ήπατος των νεογέννητων και ενηλίκων SCID-ποντικούς κατέστρεψε θύμου ή στρωματικά τροφοδότη αποκτούν την ικανότητα για να ανασυστήσουν το αιμοποιητικών οργάνων με αποκατάσταση όλων αιματοποιητικές γραμμές ακόμη και σε ενήλικα ζώα-αποδέκτες. Κατ 'αρχήν, αυτό μπορεί να τους αποδοθεί στην κατηγορία της αληθινής GSK - όπως κυττάρων λειτουργία και μετά τη γέννηση. Θεωρείται δεδομένο ότι ο σάκος του κρόκου, μαζί με την Ετήσια Γενική Συνέλευση περιοχή, μια πηγή HSCs για την οριστική αιμοποίηση στα θηλαστικά, όμως, είναι ακόμα ασαφές της συμβολής τους στην ανάπτυξη του αιμοποιητικού συστήματος. Δεν καταλαβαίνω τη βιολογική έννοια και την ύπαρξη στις αρχές της δεκαετίας εμβρυογένεση των θηλαστικών, δύο αιμοποιητικά όργανα με παρόμοιες λειτουργίες.

Η αναζήτηση απαντήσεων σε αυτές τις ερωτήσεις συνεχίζεται. In vivo απέτυχε να αποδείξει την παρουσία των λεκιθικό σάκο εμβρύων λεμφοποίησης κυττάρου 8-8,5-ημέρα στη μείωση φονικά ακτινοβολημένων SCID-ποντικούς με σοβαρή ανεπάρκεια των Τ και Β λεμφοκυττάρων. Τα αιματοποιητικά κύτταρα του σάκου κρόκου εγχύθηκαν τόσο ενδοπεριτοναϊκώς όσο και απευθείας στον ιστό της σπλήνας και του ήπατος. Μετά από 16 εβδομάδες, παραλήπτες που προσδιορίζονται Β-220 + IgM + Β κύτταρα επισημαίνονται antrhgenami δότη MHC TCR / CD34 \ CD4 + και CD8 + Τ-λεμφοκύτταρα και. Στο σώμα, έμβρυα βλαστικών κυττάρων 8-8,5 ημερών, ικανά για την αποκατάσταση του ανοσοποιητικού συστήματος, οι συγγραφείς δεν βρήκαν.

Λεκιθικό σάκο αιμοποιητικά κύτταρα διαθέτουν ένα υψηλό πολλαπλασιαστικό δυναμικό και είναι ικανά μακροχρόνιας αυτο-αναπαραγωγή in vitro. Μερικοί συγγραφείς έχουν προσδιορίσει αυτά τα κύτταρα ως βάση για τη μακροπρόθεσμη HSC (περίπου 7 μήνες) την δημιουργία ερυθροειδών προγονικών κυττάρων διακριτή από προγόνους του μυελού των οστών της γραμμής ερυθροειδούς ανακαλλιέργεια μεγαλύτερης διάρκειας, μεγάλες αποικίες μέγεθος, αυξημένη ευαισθησία σε αυξητικούς παράγοντες και πιο παρατεταμένη πολλαπλασιασμό. Επιπλέον, κάτω από κατάλληλες καλλιέργεια κυττάρων λεκιθικού σάκου σε συνθήκες vitro διαμορφώνονται και των προγονικών κυττάρων της σειράς λεμφοειδών.

Αυτά τα δεδομένα υποδηλώνουν μια γενική πηγή του λεκιθικό σάκο GSK, όπου λιγότερο από δεσμευμένοι και, επομένως, έχουν μεγάλες πολλαπλασιαστικές δυνατότητες από αρχέγονα κύτταρα του μυελού των οστών. Ωστόσο, παρά το γεγονός ότι ο σάκος κρόκος περιέχει πολυδύναμα αιμοποιητικά προγονικά κύτταρα, μακροπρόθεσμη υποστήριξη διαφόρων γραμμών των αιμοποιητικών διαφοροποίησης in vitro, το μοναδικό κριτήριο για την χρησιμότητα των GCW είναι η ικανότητά τους να ανασυστήσουν πληθυσμιακά παρατεταμένη όργανα αιμοποιητικά του αποδέκτη, αιμοποιητικά κύτταρα τα οποία είναι γενετικά ελλειμματικά ή καταστραφεί. Έτσι, το βασικό ερώτημα είναι αν τα πολυδύναμα αιμοποιητικά κύτταρα του λεκιθικού σάκου μεταναστεύουν και αποικίζουν τα όργανα αιμοποιητικών και tselesoorbrazno να αναθεωρηθεί διάσημη εργασία, η οποία κατέδειξε την ικανότητά τους να ανασυστήσουν το αιμοποιητικά όργανα των σεξουαλικά ώριμα ζώα με το σχηματισμό των μεγάλων γραμμών αιματοποιητικών. Σε έμβρυα των πτηνών στις 70-ες εντοπίστηκαν intraembrionalnye πηγές οριστική HSC, που έχει ήδη τεθεί υπό αμφισβήτηση τις καθιερωμένες αντιλήψεις για την προέλευση των εξαρτημάτων του δέρματος GSK, συμπεριλαμβανομένων των εκπροσώπων των άλλων κατηγοριών των σπονδυλωτών. Κατά τα τελευταία λίγα χρόνια υπήρχαν δημοσιεύματα για την παρουσία των θηλαστικών και των ανθρώπων παρόμοιες θέσεις intraembrionalnyh περιέχουν GSK.

Για άλλη μια φορά διαπιστώνουμε ότι η βασική γνώση στον τομέα αυτό είναι εξαιρετικά σημαντικό για μεταμόσχευση πρακτική των κυττάρων, καθώς όχι μόνο να βοηθήσει καθορίζουν την προτιμώμενη πηγή HSC, αλλά και να δημιουργήσει τις ιδιαιτερότητες της αλληλεπίδρασης των πρωτογενών αιμοποιητικών κυττάρων από γενετικά ξένους οργανισμούς. Είναι γνωστό ότι η χορήγηση των ανθρώπινων αιμοποιητικών βλαστικών κυττάρων στο εμβρυϊκό ήπαρ εμβρύου προβάτου οργανογένεση, σε στάδιο οδηγεί στην παραγωγή χιμαιρικών ζώων, του αίματος και του μυελού των οστών είναι σταθερά προσδιορίζονται από 3 έως 5% των ανθρώπινων αιμοποιητικών κυττάρων. Σε αυτή την περίπτωση, ανθρώπινα HSCs δεν αλλάζουν καρυότυπο τους, διατηρώντας ταυτόχρονα ένα υψηλό ρυθμό πολλαπλασιασμού και την ικανότητα να διαφοροποιούνται. Επιπλέον, το μεταμοσχευμένο ξενογενές HSC δεν έρχεται σε αντίθεση με το ανοσοποιητικό σύστημα και φαγοκυτταρικά κύτταρα του οργανισμού-ξενιστή και δεν μετασχηματίζεται σε καρκινικά κύτταρα που αποτέλεσε τη βάση της εντατικής ανάπτυξη μεθόδων για την ενδομήτρια διόρθωση κληρονομικής γενετικής ασθένειας χρησιμοποιώντας ΟΚΕ ή HSCs επιμολυσμένα με ανεπάρκεια γονίδια.

Αλλά σε ποιο στάδιο εμβρυογένεσης είναι πιο ενδεδειγμένο να πραγματοποιηθεί μια τέτοια διόρθωση; κύτταρα για πρώτη φορά, προσδιορίστηκε να αιματοποίηση στα θηλαστικά εμφανίζονται αμέσως μετά την εμφύτευση (6η ημέρα της κύησης), όταν τα μορφολογικά χαρακτηριστικά των αιμοποιητικών διαφοροποίησης και τεκμαρτή αιμοποιητικών οργάνων δεν είναι ακόμη διαθέσιμα. Σε αυτό το στάδιο, τα διεσπαρμένα κύτταρα εμβρύου ποντικού μπορεί ανασυστήσουν το αιμοποιητικών οργάνων ακτινοβολημένους δέκτες για να σχηματίσουν ερυθροκύτταρα και λεμφοκύτταρα, διαφορετικά από τα κύτταρα ξενιστές ή αιμοσφαιρίνης τον τύπο με αντίστοιχα glitserofosfatizomerazy και επιπλέον χρωμοσωμικό δείκτη (Tb) των κυττάρων του δότη. Στα θηλαστικά, όπως τα πουλιά, μαζί με το λεκιθικό σάκο στο κλείσιμο της συνολικής αγγειακής κλίνης απευθείας μέσα στο σώμα του εμβρύου στα παρα-αορτικής splanhnoplevre εμφανίζονται αιμοποιητικά κύτταρα. Από AGM-κατανεμηθεί αιμοποιητικά κύτταρα περιοχή ΑΑ4.1 + φαινότυπο, που προσδιορίζονται ως πολυδύναμα αιμοποιητικά κύτταρα που σχηματίζουν Τ- και Β-λεμφοκύτταρα, κοκκιοκύτταρα, μεγακαρυοκύτταρα και μακροφάγα. Φαινοτυπικά, αυτά τα πολυδύναμα προγονικά κύτταρα είναι πολύ κοντά στο HSCs του μυελού των οστών σε ενήλικα ζώα (CD34 + c-kit +). Ο αριθμός των πολυδύναμων ΑΑ4.1 + κυττάρων μεταξύ όλων περιοχή AGM-κύτταρο είναι μικρό - δεν είναι περισσότερο από 1/12 μέρος της.

Στο ανθρώπινο έμβρυο, βρέθηκε επίσης μια ομόλογη περιοχή AGM των ζώων, μια ενδοεμβρυονική περιοχή που περιείχε HSC. Επιπλέον, στους ανθρώπους περισσότερο από το 80% των πολυδύναμων κυττάρων με υψηλό πολλαπλασιαστικό δυναμικό περιέχονται στο σώμα του εμβρύου, αν και τέτοια κύτταρα υπάρχουν στον κρόκο. Μια λεπτομερής ανάλυση του εντοπισμού τους έδειξε ότι εκατοντάδες τέτοιων κυττάρων συναρμολογούνται σε συμπαγείς ομάδες που βρίσκονται σε στενή εγγύτητα με το ενδοθήλιο του κοιλιακού τοιχώματος της ραχιαίας αορτής. Φαινοτυπικά, είναι κύτταρα CD34CD45 + Lin. Αντίθετα, στον κυτταρικό σάκο, καθώς και σε άλλα αιματοποιητικά όργανα του εμβρύου (ήπαρ, μυελό των οστών), αυτά τα κύτταρα είναι απλά.

Συνεπώς, ανθρώπινα εμβρυϊκά AGM-περιοχή περιέχει συστάδες των αιμοποιητικών κυττάρων που συνδέονται στενά με την κοιλιακή αορτή ραχιαία ενδοθήλιο. Αυτή η επαφή μπορεί να εντοπιστεί και να ανοσοχημική επίπεδο - και τα σμήνη των αιμοποιητικών κυττάρων και ενδοθηλιακών κυττάρων που εκφράζουν τον αγγειακό ενδοθηλιακό αυξητικό παράγοντα, Flt-3 συνδέτη και των υποδοχέων τους FLK-1 και STK-1, καθώς επίσης και παράγοντα μεταγραφής λευχαιμίας βλαστικών κυττάρων. Τα μεσεγχυματικά παράγωγα AGM-περιοχή που αντιπροσωπεύεται πυκνά tyazhem στρογγυλεμένες κύτταρα που βρίσκονται κατά μήκος της ραχιαίας αορτής και εκφράζουν τενασκίνη C - γλυκοπρωτεΐνης βασικής ουσίας συμμετέχει ενεργά στις διαδικασίες της αλληλεπιδράσεις κυττάρου-κυττάρου και μετανάστευση.

Πολυδύναμα βλαστοκύτταρα AGM-περιοχή μετά από μεταμόσχευση ταχέως αποκαταστήσει αιματοποίηση ίη ενήλικα ποντίκια και εκτίθενται για μεγάλο χρονικό διάστημα (μέχρι και 8 μήνες) παρέχει μια αποτελεσματική αιμοποίηση. Στον κρόκο των κυττάρων με τέτοιες ιδιότητες, οι συγγραφείς δεν αποκάλυψαν. Τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης έχουν επιβεβαιωθεί από άλλες εργασίες η οποία έδειξε ότι τα πρώτα στάδια της ανάπτυξης των εμβρύων (10,5 ημέρες) περιοχή AGM είναι η μόνη πηγή των κυττάρων που ανταποκρίνονται στον ορισμό των GCW, μυελοειδών και λεμφοειδών αποκατάσταση της αιματοποίησης στον ενήλικα ακτινοβολημένους δέκτες.

Από AGM-κατανεμηθεί γραμμή στρωματικών περιοχή AGM-S3, τα οποία υποστηρίζουν την παραγωγή των κυττάρων σε καλλιέργεια CFU-GM διαπράξει προγόνους, ΒΡΙΙ-Ε, CFU-E και CFU μικτού τύπου. Το περιεχόμενο της τελευταίας όταν καλλιεργούνται σε ένα υπόστρωμα τροφοδότη AGM-S3 κυτταρική γραμμή αυξάνει από 10 έως 80 φορές. Ως εκ τούτου, στο μικροπεριβάλλον των AGM-περιοχής παρούσα στρωματικά κύτταρα, υποστηρίζοντας αποτελεσματικά το αίμα, έτσι AGM-περιοχή μπορεί επίσης να χρησιμεύσει εμβρυϊκών αιμοποιητικά όργανα - την οριστική πηγή HSC, δηλαδή, η GSK σχηματίζοντας αιματοποιητικό ιστό ενός ενήλικο ζώο.

Σύνθετη immunofenotipirovanie κυτταρική σύνθεση AGM-περιοχή έδειξε ότι δεν περιορίζεται μόνο πολυδύναμα αιμοποιητικά κύτταρα, αλλά επίσης και κύτταρα του δεσμευτεί για την διαφοροποίηση μυελοειδών και λεμφοειδών (Τ και Β λεμφοκύτταρα). Ωστόσο, όταν η μοριακή ανάλυση των μεμονωμένων CD34 + c-kit + κύτταρα από AGM-περιοχή χρησιμοποιώντας την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης αποκάλυψε την ενεργοποίηση μόνο το βήτα-σφαιρίνης και μυελοϋπεροξειδάσης, αλλά όχι λεμφοειδών γονιδίων που κωδικοποιούν τη σύνθεση του CD34, Thy-1 και 15. Μερική ειδικών γονιδίων γράμμωσης ενεργοποίησης τυπικό για πρώτα αναπτυξιακά στάδια της παραγωγής των HSCs και των προγονικών κυττάρων. Δεδομένου ότι ο αριθμός kommiti- Rowan προγόνων σε AGM-περιοχή 10-ημερών έμβρυο κατά 2-3 τάξεις μεγέθους χαμηλότερο από το ήπαρ, μπορεί να υποστηριχθεί ότι κατά την ημέρα 10 της εμβρυϊκών αιματοποίηση ίη AGM μόλις αρχίζει, ενώ κυρίως οι αιμοποιητικές γραμμές αναπτύσσονται ήδη κατά τη διάρκεια αυτής της περιόδου.

Πράγματι, σε αντίθεση με τις προηγούμενες (9-11 ημέρες) των αιμοποιητικών βλαστικών κυττάρων του σάκου του κρόκου και την περιοχή του AGM, η οποία πληθυσμιακή ανασύσταση αιματοποιητικών μικροπεριβάλλον του νεογέννητου, αλλά όχι ενηλίκων, αιμοποιητικά προγονικά κύτταρα 12-17 ημερών εμβρυϊκού ήπατος δεν απαιτεί πρώιμη μεταγεννητική μικροπεριβάλλον και αιμοποιητικά όργανα καταλαμβάνουν ένα ενήλικο ζώο δεν είναι χειρότερη από ό, τι ένα νεογέννητο. HSCs μετά από μεταμόσχευση εμβρυϊκού ήπατος ενήλικου αιμοποίηση σε ακτινοβολημένα δέκτες ποντικούς ήταν πολυκλωνικός στη φύση. Επιπλέον, χρησιμοποιώντας επισημασμένα αποικιών αποδεικνύεται ότι η λειτουργία των καθιερωμένων κλώνων ήταν τελείως υπακούει κλωνική διαδοχή, ανιχνεύθηκε στο μυελό των οστών ενηλίκων. Ως εκ τούτου, η GSK εμβρυϊκό ήπαρ έχουν χαρακτηριστεί ως πολύ ήπιες συνθήκες χωρίς prestimulyatsii εξωγενών κυτοκινών, έχουν ήδη τις βασικές ιδιότητες των ενηλίκων HSCs που δεν απαιτούνται στην πρώιμη μετα-εμβρυονικών μικροπεριβάλλον, στην κατάσταση της βαθιάς ηρεμίας μετά τη μεταμόσχευση και κινητοποιούνται klonoobrazovanie διαδοχικά σύμφωνα με το υπόδειγμα κλωνική διαδοχή.

Προφανώς, θα πρέπει να σταθούμε κάπως πιο λεπτομερώς στο φαινόμενο της κλωνικής διαδοχής. Η ερυθροποίηση φέρει αιμοποιητικά κύτταρα στελεχών που έχουν υψηλό δυναμικό πολλαπλασιασμού και ικανότητα διαφοροποίησης σε όλες τις γραμμές δεσμευμένων προδρόμων κυττάρων αίματος. Κατά την κανονική ένταση αιμοποίηση πλειονότητα των αιμοποιητικών βλαστικών κυττάρων είναι σε λανθάνουσα κατάσταση και κινητοποιείται προς το πολλαπλασιασμό και τη διαφοροποίηση των σχηματίζοντας διαδοχικά διαδοχικών κλώνους. Αυτή η διαδικασία ονομάζεται κλωνική διαδοχή. Πειραματικές ενδείξεις κλωνικής διαδοχής στο αιματοποιητικό σύστημα λήφθηκαν σε μελέτες με GSK που σημειώθηκαν με ρετροϊική μεταφορά γονιδίων. Σε ενήλικα ζώα, η αιματοποίηση διατηρείται από πολλούς ταυτόχρονα λειτουργούντες αιμοποιητικούς κλώνους που προέρχονται από την GSK. Με βάση το φαινόμενο της κλωνικής διαδοχής, αναπτύχθηκε μια προσέγγιση επαναπληθυσμού για την αναγνώριση του GCS. Σύμφωνα με την αρχή αυτή, διακρίνει μακροπρόθεσμα HSCs (μακροχρόνια αιμοποιητικών βλαστικών κυττάρων, LT-HSC), είναι σε θέση να αποκαταστήσει το αιμοποιητικό σύστημα της διά βίου μάθησης, και βραχυπρόθεσμα HSC, για να εκτελέσετε αυτή τη λειτουργία για περιορισμένο χρονικό διάστημα.

Αν λάβουμε υπόψη τα αιμοποιητικά βλαστικά κύτταρα από την άποψη της repopulyatsionnogo προσέγγισης, χαρακτηριστικό των αιμοποιητικών κυττάρων εμβρυϊκού ήπατος είναι η ικανότητά τους να δημιουργήσουν μια αποικία, η οποία ως προς το μέγεθος είναι πολύ υψηλότερες από εκείνες με μια αύξηση στην GSK αίμα του ομφάλιου λώρου ή μυελό των οστών, και αυτό ισχύει για όλους τους τύπους αποικιών. Αυτό το γεγονός δείχνει ήδη ένα υψηλότερο πολλαπλασιαστικό δυναμικό των αιματοποιητικών κυττάρων του εμβρυϊκού ήπατος. Ένα μοναδικό χαρακτηριστικό των αιμοποιητικών προγονικών κυττάρων εμβρυϊκού ήπατος - μικρότερη σε σύγκριση με άλλες πηγές του κυτταρικού κύκλου, το οποίο είναι σημαντικό από την άποψη εμπλουτισμού πληθυσμών αποτελεσματικότητας της αιμοποίησης σε μεταμόσχευση. Ανάλυση της κυτταρικής σύνθεσης των αιμοποιητικών εναιώρημα που λαμβάνεται από πηγές ώριμου οργανισμού, δείχνει ότι σε όλα τα στάδια της οντογένεσης των εμπύρηνων κυττάρων πλεονεκτικά αντιπροσωπεύεται τερματικώς διαφοροποιημένα κύτταρα, τον αριθμό και τον φαινότυπο των οποίων εξαρτώνται από την ηλικία του δότη αιματοποιητικού οντογενετικές ιστού. Ειδικότερα, ένα εναιώρημα μονοπύρηνων του μυελού των οστών και τα κύτταρα του αίματος ομφάλιου λώρου κατά περισσότερο από 50% αποτελείται από ώριμων λεμφοειδών κυττάρων γράμμωσης, ενώ λιγότερο από το 10% των λεμφοκυττάρων που βρέθηκαν σε εμβρυϊκό ήπαρ αιμοποιητικού ιστού. Επιπλέον, τα μυελοειδή κύτταρα γραμμής σε εμβρυϊκό ήπαρ και εμβρυακού ερυθροειδούς πλεονεκτικά παρουσιάζονται δίπλα, ενώ σε αίμα του ομφάλιου λώρου και μυελού των οστών κοκκιοκυττάρων-μακροφάγων επικρατούν στοιχεία.

Σημαντικό είναι το γεγονός ότι το εμβρυϊκό ήπαρ περιέχει ένα πλήρες σύνολο από τους πρώτους προκάτοχους της αιμοποίησης. Τα τελευταία περιλαμβάνουν ερυθροειδή, κοκκιοποιητικά, μεγακαρυωτικά και πολυγραμμικά κύτταρα που σχηματίζουν αποικίες. πιο πρωτόγονων προγόνων τους - LTC-IC - είναι σε θέση να πολλαπλασιάζονται και να διαφοροποιούνται ίη vitro για 5 ή περισσότερες εβδομάδες, και επίσης στη διατήρηση της λειτουργικής δραστικότητας μετά την εμφύτευση στο σώμα του παραλήπτη στο αλλογενή, και ξενογενή ακόμη μεταμόσχευση σε ζώα με ανοσοανεπάρκεια.

Βιολογικά επικράτηση σκοπιμότητας σε κύτταρα εμβρυακού ερυθροειδούς ήπατος (μέχρι 90% του συνόλου των αιμοποιητικών κυττάρων) λόγω της ανάγκης για την παροχή μάζας των ερυθροκυττάρων ραγδαία αύξηση του όγκου του αίματος του αναπτυσσόμενου εμβρύου. Σε εμβρυϊκό ήπαρ ερυθροποίηση πυρηνικών ερυθροειδών προδρόμων που αντιπροσωπεύεται διαφορετικούς βαθμούς ωριμότητας που περιέχουν εμβρυϊκής αιμοσφαιρίνης (a2u7), η οποία οφείλεται σε μια υψηλότερη συγγένεια για οξυγόνο διασφαλίζει την αποτελεσματική απορρόφηση της δεύτερης από το μητρικό αίμα. Η εντατικοποίηση της ερυθροποίησης σε εμβρυϊκό ήπαρ σχετίζεται με μια τοπική αύξηση στη σύνθεση της ερυθροποιητίνης (ΕΡΟ). Αξίζει να σημειωθεί ότι η εφαρμογή του αιμοποιητικού δυναμικό των αιμοποιητικών κυττάρων ήπατος εμβρύου επαρκώς παρουσία και μόνο ερυθροποιητίνη, ενώ δέσμευση γράμμωσης να HSCs μυελό των οστών ερυθροποίηση και αίματος ομφάλιου λώρου απαιτεί ένα συνδυασμό κυτοκινών και αυξητικών παραγόντων αποτελούμενη από ΕΡΟ, SCF, GM-CSF και IL-3. Σε αυτό το πρώιμο αιμοποιητικών προγονικών κυττάρων που απομονώθηκαν από εμβρυϊκό ήπαρ χωρίς υποδοχείς για ΕΡΟ, δεν αποκρίνονται σε εξωγενή ερυθροποιητίνη. Για την επαγωγή της ερυθροποίησης σε ένα εναιώρημα εμβρυϊκών ηπατικών μονοπύρηνων κυττάρων απαιτεί την παρουσία των πιο προηγμένων eritropoetinchuvstvitelnyh κυττάρων με τον φαινότυπο CD34 + CD38 +, που εκφράζουν τον υποδοχέα ΕΡΟ.

Η βιβλιογραφία δεν έχει ακόμα σχηματιστεί μια συναίνεση σχετικά με τη δημιουργία της αιμοποίησης στην εμβρυϊκή περίοδο. Δεν έχει καθοριστεί η ύπαρξη και η λειτουργική σημασία των εξω και intraembrionalnyh πηγές αιμοποιητικών προγονικών κυττάρων. Ωστόσο, δεν υπάρχει αμφιβολία ότι στην εμβρυογένεση ανθρώπινο ήπαρ είναι το κεντρικό όργανο της αιμοποίησης και για 6-12 εβδομάδες κύησης είναι η κύρια πηγή των αιμοποιητικών αρχέγονων κυττάρων που καταλαμβάνουν το σπλήνα, θύμο και μυελό των οστών, GDR επίτευξη των σχετικών λειτουργιών σε προ- και μεταγεννητικής περιόδους ανάπτυξη.

Πρέπει να σημειωθεί εκ νέου ότι το εμβρυϊκό ήπαρ σε σύγκριση με άλλες πηγές χαρακτηρίζεται από την υψηλότερη περιεκτικότητα σε HSC. Περίπου 30% των κυττάρων CD344 του εμβρυϊκού ήπατος έχουν φαινότυπο CD38. Ταυτόχρονα, ο αριθμός των λεμφοειδών προδρόμων κυττάρων (CD45 +) στα πρώιμα στάδια αιματοποίησης στο ήπαρ δεν υπερβαίνει το 4%. Διαπιστώθηκε ότι, όπως το έμβρυο από 7 έως 17 εβδομάδες κύησης, ο αριθμός των Β λεμφοκυττάρων αυξάνει προοδευτικά με μηνιαία «βήμα» είναι 1,1%, ενώ το επίπεδο της GSK μόνιμα μειωμένη.

Η λειτουργική δραστηριότητα των αιματοποιητικών βλαστοκυττάρων εξαρτάται επίσης από την περίοδο της εμβρυϊκής ανάπτυξης της πηγής τους. Διερεύνηση της δραστηριότητας σχηματισμού αποικιών των ηπατικών κυττάρων ανθρώπινων εμβρύων 6-8 λεπτά και 9-12 λεπτά εβδομάδες κύησης όταν καλλιεργούνται σε ημιστερεό μέσο με την παρουσία SCF, GM-CSF, IL-3, IL-6 και ΕΡΟ έδειξε ότι ο συνολικός αριθμός των αποικιών σε 1 , 5 φορές υψηλότερο όταν σπέρνουν εμβρυϊκό ήπαρ HSV σε πρώιμο στάδιο ανάπτυξης. Ταυτόχρονα, ο αριθμός των ηπατικών προγονικών κυττάρων μυελοποίηση ως CFU-GEMM, σε 6-8 εβδομάδες της εμβρυογένεσης είναι περισσότερο από τρεις φορές τον αριθμό σε 9-12 εβδομάδες κύησης. Σε γενικές γραμμές, το συκώτι αιμοποιητικών αποικιών δραστηριότητα του πρώτου τριμήνου της κύησης κυττάρων εμβρύου που σχηματίζουν ήταν σημαντικά υψηλότερη από εκείνη των ηπατικών κυττάρων του δευτέρου τριμήνου της εγκυμοσύνης εμβρύου.

Τα παραπάνω δεδομένα υποδηλώνουν ότι η εμβρυϊκό ήπαρ σε πρώιμη εμβρυογένεση χαρακτηρίζεται όχι μόνο μια υψηλή περιεκτικότητα των πρώιμων αιμοποιητικών προγονικών κυττάρων, αλλά τα αιμοποιητικά κύτταρα του χαρακτηρίζεται από ένα ευρύ φάσμα των διαφοροποίηση σε διάφορες κυτταρικές σειρές. Αυτά τα χαρακτηριστικά της λειτουργικής δραστικότητας των αιματοποιητικών κυττάρων ήπατος εμβρύου βλαστικά μπορεί να έχει κάποια κλινική σημασία, δεδομένου ότι επιτρέπουν ποιοτικά χαρακτηριστικά τους αναμένεται θεραπευτικό αποτέλεσμα όταν εκφράζονται μεταμόσχευση ακόμη και μια μικρή ποσότητα κυττάρων που ελήφθησαν στα αρχικά στάδια της κύησης.

Παρόλα αυτά, το πρόβλημα του αριθμού αιμοποιητικών βλαστοκυττάρων που απαιτείται για την αποτελεσματική μεταμόσχευση παραμένει ανοικτό και σχετικό. Καταβάλλονται προσπάθειες για την επίλυσή του με χρήση του υψηλού δυναμικού της αυτοαναπαραγωγής αιμοποιητικών κυττάρων του εμβρυϊκού ήπατος in vitro με τη διέγερσή τους από κυτοκίνες και αυξητικούς παράγοντες. Με σταθερή διάχυση στον βιοαντιδραστήρα της πρώιμης GSC του εμβρυϊκού ήπατος, μετά από 2-3 ημέρες στην έξοδο είναι δυνατό να ληφθεί ο αριθμός των αιμοποιητικών κυττάρων του στελέχους 15 φορές υψηλότερος από το βασικό τους επίπεδο. Για λόγους σύγκρισης, θα πρέπει να σημειωθεί ότι για να επιτευχθεί 20-πλάσια αύξηση της απόδοσης αίματος ομφάλιου λώρου HSC υπό τις ίδιες συνθήκες, χρειάζονται τουλάχιστον δύο εβδομάδες.

Έτσι, το εμβρυϊκό ήπαρ διαφέρει από άλλες πηγές αιμοποιητικών βλαστοκυττάρων με υψηλότερη περιεκτικότητα αμφότερων των εμπλεκόμενων και πρώιμων αιμοποιητικών προγονικών κυττάρων. Στην καλλιέργεια με ηπατικά κύτταρα εμβρύου με αυξητικούς παράγοντες με τον φαινότυπο μορφή CD34 + CD45Ra1 CD71l0W 30 φορές περισσότερες αποικίες από ό, τι παρόμοιες κύτταρα αίματος ομφάλιου λώρου, και 90 φορές περισσότερο από το μυελό των οστών HSCs. Η πιο έντονη σε αυτές τις πηγές του διαφορά στο περιεχόμενο των πρώιμων αιμοποιητικών προγονικών κυττάρων που σχηματίζουν μικτές αποικίες - ο αριθμός των CFU-GEMM σε εμβρυϊκό ήπαρ υπερβαίνει εκείνη στο αίμα του ομφάλιου λώρου και του μυελού των οστών, αντίστοιχα 60 και 250 φορές.

Σημαντικό είναι το γεγονός ότι μέχρι την 18η εβδομάδα της εμβρυϊκής ανάπτυξης (κατά την έναρξη της αιμοποίησης στο μυελό των οστών) στην εφαρμογή συνάρτησης αιμοποιητικό περιλαμβάνει περισσότερο από το 60% των κυττάρων του ήπατος. Δεδομένου ότι πριν από την 13η εβδομάδα της εμβρυϊκής ανάπτυξης σε ανθρώπους απουσιάζουν θύμου και θυμοκύτταρα, αντίστοιχα, μεταμόσχευση αιμοποιητικών ηπατικών κυττάρων των 6-12 εβδομάδων της κύησης του εμβρύου μειώνει σημαντικά τον κίνδυνο της αντίδρασης «μοσχεύματος κατά ξενιστή» και δεν απαιτεί την επιλογή ενός ιστοσυμβατό δότη, δεδομένου ότι επιτρέπει να επιτευχθεί σχετικά εύκολα αιμοποιητικός χιμαιρισμός.