Όλα τα περιεχόμενα του iLive ελέγχονται ιατρικά ή ελέγχονται για να διασφαλιστεί η όσο το δυνατόν ακριβέστερη ακρίβεια.
Έχουμε αυστηρές κατευθυντήριες γραμμές προμήθειας και συνδέουμε μόνο με αξιόπιστους δικτυακούς τόπους πολυμέσων, ακαδημαϊκά ερευνητικά ιδρύματα και, όπου είναι δυνατόν, ιατρικά επισκοπικά μελέτες. Σημειώστε ότι οι αριθμοί στις παρενθέσεις ([1], [2], κλπ.) Είναι σύνδεσμοι με τις οποίες μπορείτε να κάνετε κλικ σε αυτές τις μελέτες.
Εάν πιστεύετε ότι κάποιο από το περιεχόμενό μας είναι ανακριβές, παρωχημένο ή αμφισβητήσιμο, παρακαλώ επιλέξτε το και πατήστε Ctrl + Enter.
Southern blotting
Ιατρικός εμπειρογνώμονας του άρθρου
Τελευταία επισκόπηση: 05.07.2025
Η μέθοδος Southern blotting (που αναπτύχθηκε από τους E. Southern και R. Davis το 1975) είναι η κύρια μέθοδος που χρησιμοποιείται σήμερα για την αναγνώριση γονιδίων για μια συγκεκριμένη ασθένεια. Για να γίνει αυτό, το DNA εξάγεται από τα κύτταρα του ασθενούς και υποβάλλεται σε επεξεργασία με μία ή περισσότερες ενδονουκλεάσες περιορισμού. Τα θραύσματα που προκύπτουν υποβάλλονται σε ηλεκτροφόρηση, η οποία τους επιτρέπει να διαχωριστούν κατά μέγεθος (τα μικρότερα θραύσματα κινούνται ταχύτερα μέσω των πόρων του πηκτώματος). Τα θραύσματα στη συνέχεια μεταφέρονται (επανεκτυπώνονται) σε ένα φίλτρο νιτροκυτταρίνης, πάνω στο οποίο τοποθετείται ένας ραδιενεργά επισημασμένος ανιχνευτής. Ο ανιχνευτής συνδέεται μόνο με την συμπληρωματική αλληλουχία. Στη συνέχεια, χρησιμοποιώντας αυτοραδιογραφία, προσδιορίζεται η θέση του επιθυμητού θραύσματος γονιδιωματικού DNA στο ηλεκτροφερόγραμμα.
Ο υβριδισμός με έναν σημασμένο ανιχνευτή DNA παρασκευασμάτων DNA ή RNA που εφαρμόζεται στάγδην σε μια στερεά μήτρα χωρίς προκαταρκτικό περιορισμό και ηλεκτροφόρηση ονομάζεται υβριδισμός κουκκίδων ή σχισμών, ανάλογα με τη διαμόρφωση της κηλίδας DNA στο φίλτρο (στρογγυλή ή επιμήκης, αντίστοιχα).
[